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Ribo-seq与多组学:揭秘基因表达的隐秘层面—人生就是博—尊龙凯时

来源:丁元宝 日期:2025-03-26

在“【技术应用】解密翻译过程:Ribo-seq技术的革命性发现”中,我们探讨了Ribo-seq技术在基础研究中的独特优势与核心发现。这项技术如何将多组学数据连接在一起,成为解锁生命奥秘的关键纽带呢?今天,我们将带您全方位了解基因表达的新视角。

Ribo-seq与多组学:揭秘基因表达的隐秘层面—人生就是博—尊龙凯时

转录组数据反映mRNA的丰度,而Ribo-seq数据则体现翻译效率。通过对这两者的比较,我们可以定量分析不同基因的翻译效率,进而揭示其在翻译水平上的调控机制。例如,一些基因可能有较高的mRNA丰度,但翻译效率却较低,这可能与翻译抑制因子的作用有关。

研究思路与应用案例

2025年3月4日,东京大学医学研究所的Toshifumi Inada团队在《Nature Communications》上发表了一项研究,利用RNA-seq和Ribo-seq等技术揭示了酵母中Grr1在未折叠蛋白反应(UPR)中的关键作用。研究表明,Grr1通过介导Ubp3的降解,维持eS7A单泛素化水平,从而促进HAC1i mRNA的翻译。此外,Grr1还独立于Ubp3和eS7A的泛素化,促进HAC1u mRNA的剪接,突显其在HAC1 mRNA剪接与翻译过程中的调控机制。

在复杂的基因表达调控网络中,非编码RNA(ncRNA)长期以来被视为“暗物质”,其功能机制尚未完全揭示。随着Ribo-seq技术的兴起,我们能够从全新的视角挖掘ncRNA的潜力。Ribo-seq技术可以精确捕捉核糖体在RNA上的位置(包括mRNA和非编码RNA),联用ncRNA分析能够检测到某些ncRNA实际上并非完全“非编码”,而可能参与翻译过程,生成功能性的小肽或调控蛋白质合成。这为深入解析小肽的分子机制及其功能特性提供了关键切入点。

研究思路与应用案例

研究还表明,环状RNA(circRNA)编码的蛋白在肿瘤进展中发挥重要作用。以胶质母细胞瘤(GBM)为例,张弩教授团队通过整合Ribo-seq、circRNA-seq和质谱分析,发现GBM中circ-E-Cad显著高表达,并能翻译生成功能性蛋白C-E-Cad。深入的机制研究揭示,C-E-Cad蛋白可通过分泌途径释放至细胞外,特异性结合表皮生长因子受体(EGFR),显著激活多个关键信号通路,推动肿瘤的形成与生长。

表观组数据反映基因表达的调控信息,如DNA甲基化和组蛋白修饰。结合Ribo-seq数据,我们可以研究表观遗传修饰对翻译效率的影响,揭示其在翻译过程中的作用。RNA甲基化,尤其是m6A修饰,对核糖体与mRNA结合及翻译效率有着直接或间接的影响,从而改变Ribo-seq检测到的核糖体保护片段的分布与丰度。Ribo-seq不仅可以作为一种强有力的工具来研究RNA甲基化在翻译调控中的功能,更可以通过比较甲基化和非甲基化RNA的Ribo-seq数据来确定特定RNA的翻译效率,进而揭示RNA甲基化在某些生物学过程中的重要作用。

研究思路与应用案例

以浙江大学动科学院的研究为例,团队利用MeRIP-seq检测m6A修饰,通过Ribo-seq分析翻译过程和RNA-seq检测转录水平变化,解析YTHDF1在肠道免疫应答中的作用。结果显示,YTHDF1能够通过识别m6A修饰调控Traf6转录本的翻译效率,激活NF-κB信号通路,从而进一步促进肠道上皮细胞的免疫反应,为相关疾病的研究及治疗提供了新思路。

我们知道,基因与其产物之间的关系并非简单的线性关联,而是一种复杂的相互作用网络。作为生命的直接执行者,蛋白质的组成和含量变化一直是生物研究的核心。尽管RNA-seq能够监测基因表达变化,但由于翻译调控、翻译后修饰及蛋白质周转率等因素的影响,mRNA与蛋白质含量之间常常缺乏显著的相关性。

结合蛋白组学与Ribo-seq的研究思路

因此,通过整合蛋白组学和Ribo-seq数据,我们可以探讨翻译后修饰如何影响蛋白质翻译效率,揭示不同蛋白质的最终表达水平与翻译动态之间的关系。南京师范大学的研究团队便通过整合转录组、翻译组及蛋白质组数据,系统研究了黄颡鱼大脑对缺氧的响应机制,揭示了缺氧环境如何通过影响基因翻译效率来调节生物体的适应性。

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